疏水层析填料主要包括常压分离、减压分离和加压分离3种模式。常压分离是简单的分离模式方便、简单,但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量,但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发,并且有时在柱子外面会有水汽凝结,以及有些易分解的化合物也难以得到,而且还必须同时使用水泵或真空泵抽气。加压分离可以加快淋洗剂的流动速度,缩短样品的洗脱时间,是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗液更快洗脱。压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵等。
疏水层析填料操作的九个技巧:
1、使用前首先明确自己的分离目的,即要做哪一方面的分离,从而选择合适的凝胶填料,尤其对于没有成熟工艺的学生和研发人员,请大家务必查阅文献或者询问老师,同时根据自己的分离要求,选择合适长度和直径的层析柱;??
2、选择好层析柱和填料以后,严格按照填料的要求来操作,包括填料的溶胀、脱气、装柱,期间务必严格按照说明书操作;
3、适当控制上样量,上样以前务必要过0.22?m滤膜;
4、选择合适的流动相,根据胶的性质决定能否用泵加压;
7、使用完毕后,请将层析柱做好处理,将层析柱堵好,以防干胶或者进气泡,同时请做好试验纪录,以便下一位同学用时方便查询使用情况;
8、试验过程中所有用水或者溶液必须经过抽滤和脱气,严防气泡;
9、若在使用过程中发生意外情况。
以上就是疏水层析填料的操作建议,供大家参考。