葡聚糖凝胶是经羟丙基化处理后得到的产物,不仅可在水中应用,也可在极性有机溶剂或他们与水组成的混合溶剂中膨润使用,适合中药有效成分的分离纯化以及抗生素和化学药物的精细纯化。
葡聚糖凝胶的分离原理主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,最后出柱。如果使用反相溶剂洗脱,葡聚糖凝胶对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。
葡聚糖凝胶常选用单一的溶剂系统,应用最多的是极性强弱不同的如下五种:水、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷。根据溶剂极性的不同,样品分别发生正相或反相分配作用。
除水以外,甲醇是多年来一直使用的极性*的流动相。当甲醇作为流动相时,葡聚糖凝胶的保留行为:芳香族化合物>脂环族化合物>脂肪族化合物。甲醇作为流动相的另一个特点是:对不同芳香族化合物可选择性保留,这取决于苯环上存在的官能团及杂原子性质、数目和位置。苯环上存在的官能团及杂原子减弱了苯环本身的性质。苯环上所带的OH-越多,极性越强,在葡聚糖凝胶上滞留的时间越长。碱性物质比酸性或中性物质在葡聚糖凝胶上滞留的时间更长。