HPLC基础讲座——色谱柱的清洗与保管技巧

在日常的液相色谱（HPLC）分析中，色谱柱是实验室中最宝贵的“消耗品"。正确的清洗与保管方法，不仅能延长色谱柱的使用寿命，还能帮助我们避免许多常见的分析问题。今天，就让我们一起来了解色谱柱的维护要点吧！

一、 为什么要清洗色谱柱？
1、避免柱效下降：缓冲液、离子对试剂、酸等成分容易残留在柱内，若不清洗会加速柱子老化。

2、防止分析问题：如压力升高、峰形异常、鬼峰（Ghost peak）出现等，很多情况下都与柱内杂质沉积有关。

因此，当使用可能导致柱劣化的流动相时，必须进行清洗！

二、 日常使用时的清洗方法

1、使用相同成分且不含可能导致变质的成分（缓冲液、离子对试剂、酸等）的流动相清洗 15至30 分钟。

2、如果长期存放，请更换为出厂时使用的流动相。

例如使用 甲醇/20 mmol/L 磷酸缓冲液 = 20/80 的条件时，可以这样操作：

1） 用 甲醇/水 = 20/80 清洗约 15 分钟。

2） 若一周内继续使用，密封保存即可。

3、若一周以上不使用，需切换到出厂时的保存溶液（甲醇/水 = 70/30，再密封保存。

这样做能确保柱子在下次使用时状态稳定。

三、 出现问题时的清洗方法

用可溶解任何吸附杂质或沉淀样品/盐的溶剂清洗 30 至 60 分钟。 请勿使用碱性溶液或强酸，因为它们可能会损坏色谱柱。

1、疏水性化合物吸附：

先用甲醇清洗 30 分钟；若无改善，再尝试更强的溶剂（如 THF、氯仿）。

2、盐析出现：

先用纯水冲洗 30 分钟；再用甲醇/水体系清洗 15 分钟。

注意：避免使用强酸或碱性溶液，以免损伤色谱柱。

四、 色谱柱的保管方法

1、短期保管：用分析时的流动相密封即可。

2、长期保管：建议换成出厂保存液（如 ACN/水 = 70/30）后再密封保存。

关键点：

1、使用有机溶剂浓度较高的条件保存，能有效防止微生物滋生。

2、每次停用前检查是否需要清洗，避免因残留缓冲液或酸性条件导致柱子损坏。

五、 总结

1、色谱柱是消耗品，但正确的清洗与保管能大幅延长寿命。

2、色使用缓冲液、酸性流动相时，一定要进行适当清洗。

3、出现问题时，选择合适的溶剂进行针对性处理。

4、长期保存时，请使用推荐的出厂保存液。

让我们一起养成良好的柱子维护习惯，让每一次HPLC分析都更加顺畅、高效！