Waters色谱柱的主要优势是重现性好,此系列色谱柱使用高纯度原料,经过严密控制的填料生产流程和色谱柱装填技术,得到了市场上重现性好的高效液相色谱柱。
Waters色谱柱使用注意事项如下:
1、安装与连接:
流向标识:
色谱柱通常标有流向箭头,需按箭头方向正确安装,避免反冲。
连接管路需与色谱柱接头匹配,避免因匹配不佳导致柱效下降或渗漏。
初始冲洗:
新色谱柱安装前,需用纯有机溶剂(如乙腈或甲醇)以低流速(0.1 mL/min)冲洗,再逐步提高流速至常规分析流速,以去除柱内杂质并避免气泡进入检测系统。
2、流动相与平衡
流动相兼容性:
更换流动相前,需确保新流动相与色谱柱内当前溶剂兼容。若流动相含缓冲盐,需先用5倍柱体积的水/有机溶剂混合液冲洗,再引入缓冲流动相。
避免流动相中盐浓度过高时直接使用高比例有机相,以防盐析出导致色谱柱堵塞。
平衡时间:
反相色谱柱需用至少10倍柱体积的流动相平衡,直至压力与基线稳定。
3、操作条件控制:
压力与流速:
避免压力急剧变化,调节流速时应缓慢进行。流速需根据色谱柱规格调整,避免超过色谱柱的*大允许压力。
温度管理:
避免温度循环变化,柱温升高可降低系统压力,但不宜通过提高柱温过度降低压力。
pH范围:
反相色谱柱推荐pH范围为1-12,但极*pH条件(如pH≥8)会加速键合相水解和硅胶溶解,需降低使用温度并缩短操作时间。
4、样品处理
样品净化:
样品中的杂质是色谱柱污染的主要来源。建议使用固相萃取(SPE)小柱或超临界流体萃取(SFE)系统对样品进行净化。
样品需用0.2 μm滤膜过滤,确保滤膜材料与样品溶剂兼容,避免滤膜溶解污染色谱柱。
溶剂选择:
样品溶剂需与流动相兼容,避免进样后发生沉淀或溶剂不互溶。建议使用流动相或比流动相洗脱强度弱的溶液溶解样品,以获得优异峰形和检测灵敏度。
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