波士顿液相色谱柱是昂贵的色谱耗材,是液相色谱仪的心脏,有着严格的生产标准和测试程序,为了充分发挥色谱柱的性能,一定程度延长色谱柱的使用寿命,请仔细阅读此部分。
安装:
为了保证色谱柱使用时有最高柱效,连接管路尽量使用适合的细径管路,色谱柱进出口的连接必须非常适配,连接管端口部分必须平整,不能有毛刺和切口斜面等现象,各种连接管路请使用专业工具切割修整;
1、取出色谱柱,仔细查看柱身洗脱液流向箭头标识,用手旋下柱两端的塑料堵头,放好色谱柱,使洗脱液流向和柱身所示流向一致;
2、用手将“连接管路的不锈钢或者其它材质的接头”旋入色谱柱两端,管路接头要和色谱柱接口连接紧密,确保零死体积连接,在色谱仪正常运行时没有漏液。
色谱柱的正确使用:
色谱柱是昂贵的色谱耗材,正确的使用和维护对保证色谱柱的正常使用和延长寿命至关重要。
1、色谱柱使用前注意事项:
1)、色谱柱内的存储液:
色谱柱的存储液,如没有特殊说明均为质检报告中所述流动相,氨基(NH2)、氰基(CN)、硅胶柱(SiO2)均为正相条件–正己烷/异丙醇体系,反相柱(C1、C4、C8、C18、苯基Phenyl)均为甲醇/水体系,检测前,请用相互溶的试剂将其替换;
2)、新色谱柱的平衡:
新反相色谱柱:用纯甲醇冲洗色谱柱30个柱体积,再更换成能与检测流动相互溶的流动相冲洗30个柱体积,最后用流动相稳定系统至基线平稳;
新的正相色谱柱:用异丙醇0.5ml/min冲洗30个柱体积,再更换成检测流动相稳定系统至基线平稳;
2、色谱柱的使用方向:
高效波士顿液相色谱柱标签上的箭头方向为流动相流向,使用过程时也按此方向,避免双向混用,导致两端填料同时污染,不利于色谱柱的再生和维护;
3、流动相和样品保持洁净:
由于悬浮在样品或流动相中的细小颗粒会堵塞色谱柱两端的筛板,各种试剂尽量使用色谱纯级的,用量少的试剂纯度至少是分析纯,水最好是超纯水和全玻璃器皿双蒸水,使用前建议用0.45μm的滤膜过滤;样品溶液使用针筒过滤;
样品中的杂质是造成色谱柱污染、柱效下降的最主要原因之一,复杂样品可选样品预处理柱(SPE柱)进行样品处理,如果不方便处理,最好使用相匹配的保护柱,样品溶剂与流动相要相匹配,不能出现样品不互溶,极性相差太大等想象,否则会造成色谱峰形变差,鬼峰等现象,使用流动相溶解样品能有效的避免上述情况发生;
4、色谱柱允许使用的pH范围:
每款色谱柱都有自己特定允许使用的pH范围,请仔细对照你的色谱柱的使用pH范围,在pH范围以外使用,会使硅胶基质溶解或键合相水解,对色谱柱造成不可恢复的损伤,如果在临界pH处使用,分析结束后立即用适合于色谱柱保存并与当前使用的流动相互溶的淋洗液置换掉。
5、PAH专用色谱柱使用注意事项:
PAH专用色谱柱是针对欧盟76/769/EEC号环保指令专门设计开发的专用色谱柱,同时分离16种多环芳烃物质,是一类含有一个苯环以上的芳香化合物,为了保障色谱柱的分离能力,请尽量专柱专用