COSMOSIL色谱柱的柱长及内径的选择原则是什么？

　　COSMOSIL色谱柱的柱长及内径的选择原则是什么？长度的选择：柱越长，总柱效越高(n值越大)，柱越长，分析时间也越长。250—300mm是普遍的柱长，实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子，一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物；500—600mm，要求较高分辨率的应用，—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。

　　内径：柱效率与柱半径平方成反比，内径越小柱效越高，但内径越大，柱容量也增加，允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时，则因柱内每块理论板内不能建立真正的平衡，将会导致色谱峰畸变，柱分辨率降低，重现性不好。因此对于复杂样品需要准确分离，必须使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物，为了增加样品容量就必须使用内径大的柱子，目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。

　　分析大分子量化合物选择大孔径色谱柱；对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱，以改善峰形，延长色谱柱使用寿命等。COSMOSIL色谱柱内径有2.1、3.0、4.6、10mm可供选择，不锈钢材质不易因为磕碰损坏柱管。

　　正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出，因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话：使用前要过滤，使用后要冲洗。具体方法如下：

　　1、等度条件：使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以1、0ml/min流速冲洗60min；使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0、2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。

　　2、梯度条件：用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前，用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1、0ml/min流速冲洗60min，再用该过渡流动相以1、0ml/min冲洗色谱柱120min。含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓，以避免梯度过程中缓冲盐析出。

　　3、缓冲盐析出的补救方法：

　　a、用甲醇/20/80以1、0ml/min流速35摄氏度条件下反向冲洗色谱柱120min

　　b、用甲醇/水=20/80以0、2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。