COSMOSIL色谱柱的使用:
色谱柱在使用前,至好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是*条件),只有这样,测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理:
a、至好使用流动相溶解样品。
b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2、流动相的配制:
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:
a、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器,至好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。
f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
COSMOSIL色谱柱注意事项:
新色谱柱运用:先用10~20倍柱体积的色谱级甲醇和乙腈由低流速缓慢进步至正常流速冲刷,随后换至10%甲醇低流速缓慢进步至正常流速冲刷分清色谱柱方向尽量在色谱柱前段加维护柱,并定时清洗维护柱色谱柱冲刷运用结束先用10%甲醇/水冲刷,如果长时间不必再用纯甲醇冲刷、维护(一般情况下,10%甲醇/水低流速冲刷过夜)
COSMOSIL色谱柱的维护:
1、使用预柱保护分析柱;
2、尽量不超过该色谱柱的ph范围;
3、避免流动相组成及极性的剧烈变化;
4、流动相使用前必须经脱气和过滤处理;
5、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中;
6、压力升高是需要更换预柱的信号。