高效薄层层析板制备步骤和方法

　　高效薄层层析板是用薄层层析硅胶，用适当的粘合剂充分混合均匀后，经脱气处理使用进口涂布机械均匀地涂布在洁净的玻璃板上，晾干后，置于恒温鼓风干燥箱中经105摄氏度活化半个小时而成。板面平整光洁，薄层均匀牢固，无龟裂、气泡、掉粉等现象。

　　高效薄层层析板的特点以及制备：

　　高效薄层层析板就是我们通常所说的硅胶板，要了解制作与操作方法必须先知道：其原理;薄层层析法是一种微量而快速的分析方法，操作容易，设备要求低，但对于每一种被分离的物质都需要各自独立的方法，TLC主要应用于氨基酸、多肽、糖脂、核苷酸和生物碱类多种物质的分离和鉴定。

　　1.样品的溶解：将薄层层析板样品溶于展开剂极性相近、挥发性高的有机溶剂。

　　2.点样：控制上样量，点样基线距底边2.0 cm，控制样点直径(5 mm)及点间距离(1-1.5 cm),避免因扩散而影响检测(下图),点样时必须注意勿损伤薄层表面。

　　3. 展层：展层容器必须密封，提前加入展开溶剂，使溶剂蒸气达到平衡。展开剂不能高于上样点，否则，无法求得Rf值和准确判断粗产物中各组分在薄层板上的相对位置。

　　4. 高效薄层层析板展开剂的选择条件：有良好的溶解性、使待分离组分间分开、待测组分的Rf值在0.2~0.8之间、不与待测组分或吸附剂发生化学反应、沸点适中，黏度较小、展开后组分斑点圆且集中、混合溶剂用新鲜配制。

　　5. 边缘效应：边缘效应是样品在层析时，薄层板两边的斑点比中间斑点移动快，并向两边偏斜。其原因是用混合溶剂展开时，极性较弱和沸点较低的溶剂在薄层板两边沿处较易挥发，使薄层板上的展开剂比例不一，而出现边缘效应，解决边缘效应zui有效的方法是剪去薄层板浸入展开剂一端的两角。